INRAE, Centre Val de Loire - Orléans, 2163, Avenue de la pomme de pin, CS 4001 Ardon, 45075 Orléans cedex 2
- Tel : +33 (0)2 38 41 78 24 (Accueil, P. Montes)
- F. Laurans, responsable INRAE activités XYLOBIOTECH
- Fax : +33 (0)2 38 41 48 09
- Email : patricia.montes-duran@inra.fr
Présentation générale
Le site INRAE de XYLOBIOTECH met à disposition des utilisateurs un microscope confocal à balayage laser Zeiss LSM 700 ainsi que des protocoles de préparation des échantillons végétaux et une expertise en anatomie cellulaire végétale.
Cet équipement permet à la fois les observations en fluorescence multiple associées à l'analyse de colocalisation, l'imagerie 3D et l'imagerie spectrale. Il offre également la possibilité de réaliser de l'imagerie de cellules vivantes (FRAP, FLIP, photoactivation et photoconversion) afin d'étudier les processus de transport dans les cellules.
| Le microscope est localisé dans le laboratoire d'histocytologie de l'UMR BioForA (Biologie intégrée pour la valorisation de la diversité des arbres et de la forêt) dédié à l'étude de la formation du bois. Ce laboratoire possède une expertise reconnue en histologie et observation microscopique adaptée à l'étude de la formation du bois. |
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Ingénieur responsable du plateau technique INRAE de XYLOBIOTECH :
Françoise Laurans (IR2 INRAE - UMR BioForA)
+33 (0)2 38 41 78 38
Email: francoise.laurans@inrae.fr
Conditions d'accès au plateau technique
L'utilisation de cet équipement XYLOBIOTECH nécessite l'expertise de l’ingénieur responsable du plateau technique INRAE qui en assure le fonctionnement et propose des actions d'aide à la conception d'expérience, de conseil et d'accompagnement pratique pour l'expérimentation et la préparation des échantillons.
Pour toute demande prendre contact avec l'ingénieur responsable. Un premier entretien permettra de fixer les conditions de la prestation XYLOBIOTECH. Les attentes de l’utilisateur dans le cadre des possibilités techniques offertes par le plateau technique seront ensuite formalisées dans une fiche de demande de travaux.
Chaque demande fera l'objet d'un devis sur mesure et des frais de gestion de dossier seront d'office imputés.
Le plateau est accessible du Lundi au Jeudi de 8h30 à 18h00.
Description du matériel
Microscope confocal à balayage laser
| Microscope | Zeiss LSM700 |
| Statif | Droit Axio Imager Z2 sur table antivibration |
| Raies Lasers | Diodes lasers 405 nm, 488 nm, 555 nm, 639 nm |
| Filtres | DAPI, GFP, CY3/Rhodamine |
| Détecteurs | 2 détecteurs PMT en réflexion, 1 détecteur en transmission |
| Objectifs | 10x/0,3 M27 Plan-Néofluar 20x/0,8 M27 Plan-Apochromat coulisseau DIC 40x/1,0DICM27 Plan-Apochromat 63x/1,40 oil DIC M27 Plan-Apochromat |
| Source de lumière | Fluorescence Metal halide (120W), lumière blanche halogène 100W |
| Déplacement XY | Platine piezo motorisée Joystick |
| Déplacement Z | Motorisé précision de 10 nm |
| Vitesse d'acquisition | 5 images/seconde |
| Acquisition d'images | Images multi-marquages 2D 3D En simultané ou séquentiel Séparation spectrale FRAP (FLIP) FRET |
| Logiciel d'acquisition | ZEN 2010 |
Exemples de prestations et coûts associés
Exemple de réalisation 1
Colocalisation dans les parois cellulaires des fibres de bois de peuplier après immunomarquage sur coupes semi fines (images à basse définition dédiées au site web).
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Immunlocalisation de deux classes de composés pariétaux dans les parois cellulaires des fibres de bois en microscopie confocale
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Nombre de coupes observées : 24
Durée de réalisation : 8 heures
Coût : 400 € HT
Le coût ne tient pas compte de la réalisation des coupes et de l'expérience d'immunomarquage. Il comprend uniquement les frais d'observation
Exemple de réalisation 2
Microphénotypage de plants de peupliers transgéniques produits par transformation combinatoire et affectés pour le métabolisme de la lignine (images à basse définition dédiées au site web). L’analyse à l’échelle microscopique du xylème montre une autofluorescence forte des parois cellulaires autour des vaisseaux.
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| Autofluorescence des parois cellulaires du xylème dans le phénotype sauvage (A, B et C) et pour une lignée transgénique (D, E et F) observée au microscope confocal (excitation 488 nm, LP filter 490 nm). A et E : image en transmission Barre d’échelle = 50 µm. |
Nombre de coupes observées : 18
Durée de réalisation : 4 heures
Coût : 200 € HT
Le coût ne tient pas compte de la réalisation des coupes. Il comprend uniquement les frais d'observation.